假单胞菌（Pseudomonas）是革兰氏阴性菌中分布广泛、功能多样的一大类群，在工业、农业及环境领域展现出巨大应用潜力。近日，中心科研人员聚焦一种具有显著耐盐特性的假单胞菌Pseudomonas oleovorans，鉴定了其耐盐相容物甘油葡糖苷（GG）的合成能力。然而，该菌存在的遗传操作难题制约了其深入的功能研究与应用开发。为此，中心科研人员与哈尔滨师范大学学者合作，成功建立了基于电转化的高效遗传操作系统，为该菌株的基因工程改造奠定了技术基础。研究发现，氨基糖苷类抗生素对该菌生长具有显著抑制作用，可作为其遗传操作的筛选标记。通过系统优化转化温度、DNA浓度、预孵育与复苏时间，电转化效率提升了三个数量级，到达10⁴ CFU/µg DNA。利用广宿主质粒pBBR1MCS-5，作者验证了此类载体可实现异源基因在该菌细胞中的稳定可控表达。此外，研究鉴定了其基因组上的两个遗传中性位点，在这些位点的外源基因整合对细胞的生长和代谢无明显影响。上述遗传操作平台为深入揭示Pseudomonas oleovorans盐适应代谢调控机制及开发其生物技术应用潜力提供了支撑。该研究获得了国家自然科学基金与山东省自然科学基金资助，成果近日发表于《Frontiers in Microbiology》杂志。

原文信息：

Hongjiao Ke, Zhichao Zhang, Yan Liu*, Quan Luo*, Xuefeng Lu*, 2025, Development of genetic manipulation tools for Pseudomonas oleovorans. Frontiers in Microbiology, 16:1691967. https://doi.org/10.3389/fmicb.2025.1691967

文/图：柯红娇